小型豬在解剖、生理和營養(yǎng)代謝等方面與人類極為相似，是人類醫(yī)學(xué)研究的理想模型動物，在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用數(shù)量迅速增加。在應(yīng)用小型豬的實驗研究中，經(jīng)常需要采集血液，進行血液生物化學(xué)成分和血液細胞學(xué)等各種分析。本實驗室在長期的小型豬實驗研究中，對前腔靜脈、耳緣靜脈、四肢靜脈（前肢掌背側(cè)靜脈、后肢外側(cè)隱靜脈）、頸靜脈等各種靜脈血液采集方法進行了探索，積累了一些經(jīng)驗。本文對這些采血方法進行介紹和討論。
1、耳靜脈采血
1.1 材料
小型豬保定吊床，由本研究所設(shè)計和制做。另外準備動物剪毛推子，頭皮針、注射器，消毒酒精、紗布、棉簽等。
1.2 方法
1.2.1 剪毛
用動物剪毛推子或剪刀清除耳朵表面被毛（不同品種耳朵表面被毛疏密、長短不同）。
1.2.2 擴張血管
可用紗布反復(fù)擦拭耳朵表面皮膚，或采用熱敷、燈烤等方法使血管充盈，以便采血。
1.2.3 消毒
用75%酒精由內(nèi)向外消毒采血部位，使用碘酒、碘伏等消毒液時應(yīng)使用酒精脫碘，以便能夠清晰暴露血管。
1.2.4 采血
待消毒液（采血部位）完全干燥后再進行采血，以免酒精等消毒液對相關(guān)檢測造成干擾（如酒精對血糖值的顯著影響）。
1.2.5 止血
采血后用滅菌棉球或紗布等壓迫采血部位2min-5min，并確定止血效果。
1.3 注意事項
需要微量血液時（如1滴-數(shù)滴），用無菌注射器針頭直接刺破末梢血管，選擇不同粗細針頭可有不同出血量；需要血量較大時，先對耳朵進行加熱處理以擴張血管是必要的，選較粗血管，逆血流方向進針效果較好。
2、四肢靜脈采血
2.1 材料
小型豬保定吊床。另外準備動物剪毛推子，止血帶，頭皮針、注射器，消毒酒精、紗布、棉簽等。
2.2 方法
2.2.1 剪毛
用動物剪毛推或剪刀清除四肢采血部位被毛，前肢為肘關(guān)節(jié)下方10cm范圍（掌背側(cè)靜脈），后肢為膝關(guān)節(jié)下方外側(cè)10cm范圍（外側(cè)隱靜脈前支或外側(cè)隱靜脈后支）。
2.2.2 消毒
用消毒酒精由內(nèi)向外消毒采血部位，使用碘酒、碘伏等消毒液時應(yīng)使用酒精脫碘，以便能夠清晰暴露采血部位。
2.2.3 扎止血帶
在采血部位上端（近心端）扎緊止血帶，使采血部位血管充盈。
2.2.4 采血
前肢在膝關(guān)節(jié)正中部位下或上1cm-2cm處進針，用拇指按壓有時可以感覺到血管搏動；后肢外側(cè)隱靜脈前支或后肢外側(cè)隱靜脈后支血管充盈后用拇指按壓可觸及，小豬或皮下脂肪薄時，血管隱約可見。
2.2.5 止血
采血后用滅菌棉球或紗布等壓迫采血部位2min-5min，并確定止血效果。
2.3 注意事項
小型豬四肢靜脈血管位置較深，即使扎止血帶也很難在體表看見；如果在動物清醒狀態(tài)下采血，應(yīng)盡量固定四肢不動；固定四肢的繩索應(yīng)選用寬條樣式，普通繩索會在動物掙扎時勒得太緊而產(chǎn)生勒痕和四蹄淤血；使用頭皮針（蝶形針）并與軟管連接可防止動物掙扎時針頭脫落。
3、前腔靜脈采血
3.1 材料
麻醉劑（常用3%戊巴比妥鈉、豬麻醉劑），注射器，消毒酒精、紗布、棉簽等。
3.2 方法
3.2.1 麻醉保定
將豬常規(guī)麻醉后或人力保定仰臥在地面或?qū)嶒炁_上，由助手將前肢分開并固定。
3.2.2 確定采血位置
胸骨前端左或右側(cè)，與第一肋骨、氣管圍成的三角區(qū)（前腔窩）為穿刺位置。
3.2.3 消毒
用75%酒精或碘酒、碘伏等消毒液，由內(nèi)向外消毒采血部位。
3.2.4 采血
在前腔窩處垂直進針約4cm-5cm（進針深度隨動物大小而不同），進入前腔靜脈血液會自動涌出。
3.2.5 止血：以滅菌紗布用力抵住采血部位。
3.3 注意事項
若人力保定，須確保豬固定不動，否則可能因動物掙扎而穿透血管難以止血；保定動物采取仰臥位，兩前肢彎向尾側(cè)，便于確定采血位置；前腔靜脈位置較深，采血針頭應(yīng)足夠長；為避開膈神經(jīng)，采血部位通常選擇右側(cè)；因為向心方向進針有時會扎到心房，所以采取垂直進針的方法較為安全，如果一次穿刺無血液流出，應(yīng)拔出針頭重新進針；前腔靜脈采血可以應(yīng)用于解剖取材前的大量采血，一般不用于實驗期間的采血，因為操作不當(dāng)時可能造成局部大出血甚至動物死亡。
4、頸內(nèi)靜脈留置導(dǎo)管采血
氣管的兩側(cè)均有頸內(nèi)靜脈，下面以左側(cè)為例。
4.1 材料
麻醉劑（常用3%戊巴比妥鈉、豬麻醉劑），動物剪毛推子，手術(shù)器械，靜脈留置管，自制保護口袋5cm×5cm，消毒酒精、紗布、棉簽等。
4.2 方法
4.2.1 麻醉保定
將豬常規(guī)麻醉后右側(cè)位翻倒固定在手術(shù)臺上。
4.2.2 剪毛
在頸部左側(cè)胸骨上窩至甲狀軟骨間15cm×15cm范圍剪毛。
4.2.3 消毒：
使用碘酒、碘伏等消毒液對手術(shù)區(qū)域進行消毒。
4.2.4 分離頸內(nèi)靜脈
在左側(cè)的頸側(cè)面胸骨上窩，至甲狀軟骨間正中向氣管方向縱向切開皮膚5cm，逐層分離，頸總動脈和頸內(nèi)靜脈伴行，利用鈍性剝離技術(shù)將頸內(nèi)靜脈分離3cm。
4.2.5 結(jié)扎
結(jié)扎頸內(nèi)靜脈遠心端并在頸內(nèi)靜脈近心端預(yù)留好結(jié)扎線，用眼科剪在頸內(nèi)靜脈上剪一小口，向心方向插入靜脈留置導(dǎo)管，插入深度約10cm，用預(yù)留的結(jié)扎線結(jié)扎好頸內(nèi)靜脈連同靜脈留置導(dǎo)管，為防止靜脈留置導(dǎo)管脫落，應(yīng)結(jié)扎2-3道。
4.2.6 打隧道
豬右側(cè)臥位，從頸內(nèi)靜脈留置導(dǎo)管處向頸背部打洞，穿入靜脈留置導(dǎo)管，或消毒頭頸部、背部的皮膚及導(dǎo)管，在動物的頸部及背部依次切開數(shù)個皮膚切口，用血管鉗在皮下戳開一個皮下隧道，將導(dǎo)管埋于皮下，而導(dǎo)管的末端接口引至背部。然后縫合切口及固定導(dǎo)管接口。
4.2.7 固定頸背部的外露采血接口
將預(yù)先準備的保護口袋縫在豬頸背部，將導(dǎo)管接口用肝素帽封好，放入保護口袋，鎖上拉鏈。
4.2.8 術(shù)后傷口消毒。
4.2.9 通過肝素帽采血。
4.3 注意事項
導(dǎo)管脫落、導(dǎo)管感染、導(dǎo)管堵塞等問題較為常見。對于導(dǎo)管脫落問題，除了采取多線固定導(dǎo)管口以外，還在豬背部縫保護口袋，用來保護導(dǎo)管口；為防止感染，每天清洗消毒皮膚縫合處，導(dǎo)管末端的注射帽在應(yīng)用之前應(yīng)該以異丙醇進行清潔，以減少細菌進入導(dǎo)管的風(fēng)險；為防止導(dǎo)管堵塞，采血后先用鹽水沖洗導(dǎo)管再用肝素鹽水（2UPml）沖洗導(dǎo)管并封閉，不采血時應(yīng)每天沖洗并重新封閉。
5 討論
豬的血液采集方法較多，常用的如前腔靜脈采血、耳靜脈采血，眼眶靜脈竇采血也逐漸得到推廣應(yīng)用，特殊情況時頸靜脈留置導(dǎo)管可以反復(fù)采血。另外乳靜脈、尾靜脈采血也有應(yīng)用。由于豬皮膚和皮下脂肪較厚，四肢靜脈采血鮮有使用。本實驗室在小型豬2型糖尿病模型建立及小型豬動脈硬化模型建立課題研究中，長期使用五指山小型豬、廣西巴馬小型豬和中國農(nóng)大小型豬，對三種小型豬不同部位血管的采血方法進行了長期摸索，得出以下三種觀點。
（1）少量采血時優(yōu)選耳靜脈采血方法，例如血糖快速檢測、單次血常規(guī)或血生化檢測。耳靜脈采血優(yōu)點較多，如不需要麻醉、血管清晰可見、操作簡便；缺點是采血量小，即使在預(yù)先對耳朵進行熱敷處理血管充盈時，采血量也不超過5mL。另外還應(yīng)注意的是，不同品種小型豬耳朵大小、膚色、表面被毛疏密長短及血管分布差別較大，如廣西巴馬小型豬耳朵短小，膚色多為白色、黑色或白黑雙色，血管位置稍深，分支少，較易充盈；五指山豬耳朵大小適中，膚色黑，耳緣處血管分支多且表淺，易充盈；中國農(nóng)大小型豬耳朵較大，膚色黑或灰，血管深淺、分支密度介于巴馬和貴州之間。
（2）大量采血時優(yōu)選四肢靜脈采血方法，例如血生化、血常規(guī)、凝血三項、糖化血紅蛋白、血清胰島素等多種指標(biāo)同時檢測。四肢靜脈采血的優(yōu)點包括：不需要麻醉動物，采血量大，能夠滿足多種指標(biāo)同時檢測所需的血量；缺點是小型豬四肢靜脈血管位置較深，即使扎止血帶也很難在體表看見，需要練習(xí)才能掌握采血技術(shù)。采血操作時應(yīng)該注意不同年齡、不同體重的豬皮膚及皮下脂肪厚度差異較大，使用年齡小的豬，進針應(yīng)稍淺，年齡大或體重大的豬，進針應(yīng)稍深。與前肢掌背側(cè)靜脈比較，后肢外側(cè)隱靜脈前支或后肢外側(cè)隱靜脈后支位置稍淺，采血時更適用。為防止因豬躁動、掙扎而造成的針頭脫出，可以使用有軟管連接的頭皮針，讓針頭隨豬的掙扎運動而運動，但要注意凝血及針頭堵塞等問題。
（3）前腔靜脈采血和靜脈留置導(dǎo)管采血方法較少采用。前腔靜脈采血量雖然很大，但很難在清醒狀態(tài)時操作，還應(yīng)該注意這種深在的大靜脈在采血后止血效果難以確定，一般應(yīng)用于解剖取材前的大量采血，而不用于實驗中途采血，前腔靜脈采血不當(dāng)時會造成局部大出血甚至動物的死亡；頸內(nèi)靜脈留置導(dǎo)管，可以隨時、方便地進行采血、輸液和中心靜脈壓檢測等，但是手術(shù)操作和導(dǎo)管埋置等對動物的損傷較大，另外導(dǎo)管脫落、導(dǎo)管感染、導(dǎo)管堵塞等問題較為常見。
